dentysta szczecin podjuchy

Rekombinowaną ludzką IL-17 (rhIL-17) zakupiono od PeproTech EC Ltd. (Londyn, Zjednoczone Królestwo). Przeciwciało poliklonalne przeciw ludzkiemu IL-17 (kozie IgG) i zrekombinowany mysi TNF-a zakupiono od R & D Systems Inc. (Minneapolis, Minnesota, USA). Rekombinowana ludzka IL-1 p zakupiono od Genzyme Pharmaceuticals (Cambridge, Massachusetts, USA). (3, 25 (OH) 2D3 i PGE2 otrzymano z Wako Pure Chemical Industries Ltd. (Osaka, Japonia). Syntetyczny ludzki PTH (1-34) został dostarczony przez Asahi Chemical Industry (Tokio, Japonia). NS398 zakupiono od Calbiochem-Novabiochem Corp. (La Jolla, Kalifornia, USA). Ludzką kalcytoninę znakowaną 125I otrzymano z Amersham Pharmacia Biotech (Buckinghamshire, Wielka Brytania). Zrekombinowane ludzkie sondy OCIF i cDNA dla mysich ODF i OCIF zostały dostarczone przez Snow Brand Milk Products Co. (Tochigi, Japonia) (15, 18, 33). Inne chemikalia i odczynniki były jakości analitycznej. System mysiej hodowli dla osteoklastogenezy. Aby przygotować pierwotne osteoblasty, w sumie 20-30 kawałków calvari zebranych od nowonarodzonych myszy trawiono 0,1% kolagenazą (Wako Pure Chemical Industries Ltd.) i 0,2% dispase (Godo Shusei, Tokio, Japonia). Komórki szpiku kostnego otrzymano od dorosłych myszy. Osteoblasty hodowano wspólnie z komórkami szpiku kostnego, jak opisano (34). W skrócie, pierwotne osteoblasty (2 x 104 na studzienkę) i zarodkowane komórki szpiku kostnego (5 x 105 na studzienkę) hodowano wspólnie w 48-studzienkowych płytkach (Corning Glass Inc., Corning, Nowy Jork, USA) z 0,3 ml. MEM (GIBCO BRL, Gaithersburg, Maryland) zawierający 10% FBS (JRH Biosciences, Lenexa, Kansas, USA) w obecności badanych substancji chemicznych. Hodowle inkubowano w czterech powtórzeniach, a komórki uzupełniano w dniu 3 świeżą pożywką. Tworzenie OCL oceniono po hodowli przez 6. 7 dni. W niektórych eksperymentach użyto komórki intercell z filtrem membranowym (wielkość porów 0,45 .m na dole) (wkładka do hodowli komórkowej Falcon 3090, Becton-Dickinson and Co., Lincoln Park, New Jersey, USA) w celu zbadania wymagań dla kontakt komórka-komórka. Adherentne komórki utrwalono i wybarwiono dla TRAP, a liczbę OCL pozytywnych wobec TRAP oceniano zgodnie z opisem (34). W celu barwienia TRAP komórki adherentne utrwalano 10% formaldehydem w PBS przez 3 minuty. Po traktowaniu etanolem / acetonem (50:50 obj./obj.) Przez minutę, powierzchnię studzienki wysuszono na powietrzu i inkubowano przez 10 minut w temperaturze pokojowej w buforze octanowym (0,1 M octan sodu, pH 5,0) zawierającym 0,01% naftolu AS Fosforan -MS (Sigma Chemical Co., St. Louis, Missouri, USA) jako substrat i 0,03% czerwono-fioletową sól LB (Sigma Chemical Co.) jako barwnik dla produktu reakcji w obecności 50 mM winianu sodu. Komórki pozytywne wobec TRAP pojawiły się ciemnoczerwone. Pozytywne wobec TRAP komórki wielojądrowe zawierające więcej niż 3 jądra były liczone jako OCL. Ekspresję receptorów kalcytoniny oceniano przez autoradiografię z użyciem znakowanej 125I ludzkiej kalcytoniny, jak opisano (35). Po kopulacji komórek szpiku kostnego i osteoblastów przez 8 dni na plastrze zębiny, wory do resorpcji oglądano przez barwienie hematoksyliną Meyer a jak opisano wcześniej (35). Pomiar zawartości PGE2 w pożywkach hodowlanych. Stężenie PGE2 w pożywkach hodowlanych oznaczono stosując enzymatyczny test immunologiczny (EIA, Amersham Pharmacia Biotech) (36). Przeciwciało wykazywało następującą reaktywność krzyżową, gdy obliczono je przez stosunek związany / wolny: PGE2, 100%; PGE1, 7,0%; 6-keto-PGEl5, 5,4%; PGF2. 4,3%; i PGD2, 1,0%. Pacjenci. Analizie poddano dziesięciu mężczyzn i 33 pacjentki, które spełniły kryteria Amerykańskiego Towarzystwa Reumatologicznego (37) w odniesieniu do określonego lub klasycznego RA. Kontrolne osoby obejmowały 9 OA, 4 urazy i 7 pacjentów z dną. Wszyscy pacjenci dnę mieli ostre dnawe zapalenie stawów. Uzyskano świadomą zgodę na kolejne zabiegi od wszystkich pacjentów. Próbki tkanek
[hasła pokrewne: koński pasożyt, barszcz zwyczajny, zielonkawy stolec ]