jak się pozbyć zaskórników i wągrów

Liczba toczących się komórek B była najwyższa przy szybkości ścinania dyn / cm2 i zmniejszała się, gdy ścinanie zwiększono do 1,5 dyn / cm2 lub więcej (Figura 1b). Prędkości walcowania komórek B wynosiły 40. 11 przy 1,8 dyn / cm2 i zmniejszono do 10. 4, gdy poziom naprężenia ścinającego został obniżony do dyn / cm2 (Figura 1c). Na podstawie tych danych, prędkość przepływu dyn / cm2 została wykorzystana dla wszystkich późniejszych eksperymentów adhezji przepływu. Figura 1Adhezja limfocytów B do monowarstw HUVEC w określonych warunkach przepływu laminarnego. Konfluentne monowarstwy HUVEC hodowane na szklanych szkiełkach nakrywkowych aktywowano lub nie (kontrola) za pomocą TNF-a. przez 4 godziny, a następnie szkiełka nakrywkowe umieszczono w komorze przepływowej z równoległymi płytkami. Limfocyty B perfundowano przez komorę przy oszacowanym naprężeniu ścinającym ściany wynoszącym dyn / cm2 (0,54 ml / min) (a), lub limfocyty B perfundowano przez 4-godzinne monowarstwy HUVEC aktywowane TNF-. przy 1, 1,5, lub 1,8 dyn / cm2 (bic). Liczbę ruchomych i przylegających komórek na pole widzenia określono przez analizę taśm wideo, jak opisano w Metodach. Wartości reprezentują średnią liczbę oddziałujących komórek (a), średnią arytmetyczną. SEM liczba komórek tocznych (b) lub prędkość toczenia (c) obliczona z 3 niezależnych eksperymentów po 5 minutach perfuzji na każdym poziomie przepływu. W celu identyfikacji cząsteczek na powierzchni śródbłonka zaangażowanych w te oddziaływania adhezyjne, komórki śródbłonka traktowano blokującymi mAb skierowanymi na różne cząsteczki adhezyjne. MAb blokujące anty-E-selektynę praktycznie zniosło te interakcje, pokazując, że E-selektyna pośredniczy w początkowym wiązaniu i toczeniu komórek B na pojedynczej warstwie śródbłonka. Ani P-selektyna, ani cząsteczka adhezyjna komórek naczyniowych (VCAM-1) nie były zaangażowane, ponieważ blokowanie mAb przeciwko tym cząsteczkom nie wpływało na walcowanie (Figura 2). Ryc. 2B – Toczenie limfocytów na aktywowanym śródbłonku odbywa się za pośrednictwem E-selektyny. Czterogodzinne TNF. – aktywowane monowarstwy HUVEC hodowano na szklanych szkiełkach nakrywkowych i traktowano przez 20 minut w temperaturze pokojowej 10 .g / ml mAb skierowanego przeciwko HLA klasy I (W6 / 32), E-selektynie (H18 / 7). P-selektyna (HDPG 2/3) lub VCAM-1 (4B9); następnie szkiełko nakrywkowe złożono w komorze przepływowej z równoległymi płytkami. Komórki B poddawano perfuzji przez monowarstwy HUVEC przy oszacowanym naprężeniu ścinającym dyn / cm2 przez 5 minut, a liczbę ruchomych komórek określono w 4 oddzielnych polach w różnych punktach czasowych każdego niezależnego eksperymentu. Wartości reprezentują środki arytmetyczne. SEM liczba toczących się komórek obliczona z 3 niezależnych eksperymentów. Aby dalej badać ruch komórek B na selektywności śródbłonka, eksperymenty adhezji przepływowej przeprowadzono stosując monowarstwy komórek CHO trwale transfekowanych ludzką selektyną P i selektyną E. Limfocyty B nie przyczepiały się ani nie toczyły na rodzicielskich nietransfekowanych komórkach CHO (CHO-DUKX) (Figura 3). Transfektanty selektyny P (CHO-P) również nie były zdolne do wspomagania walcowania komórek B (Figura 3), chociaż konsekwentnie wspierały one zwijanie neutrofili i HL60 w doświadczeniach przeprowadzanych równolegle (nie pokazano). Przeciwnie, komórki B łatwo wchodzą w interakcję z transfektantami E-selektyny (CHO-E) i walcują przy niskich prędkościach 17. 3 m / s. Specyficzność tych oddziaływań adhezyjnych dodatkowo wykazano przez traktowanie monowarstw CHO-E blokującym mAb przeciwko selektynie E, która całkowicie hamowała zwijanie komórek B (Figura 3). Rolowane interakcje zniesiono stosując EDTA chelatujący Ca2 + (dane nie pokazane). Rycina 3E-selektyna, ale nie selektyna P, transfektanty wspomagają zwijanie limfocytów B. Monowarstwy CHO-DUKX, CHO-P i CHO-E hodowano na szklanych szkiełkach nakrywkowych. Te ostatnie traktowano przez 20 minut 10 .g / ml mAb skierowanego do HLA klasy I (W6 / 32) lub E-selektyny (H18 / 7). Następnie limfocyty B perfundowano przez monowarstwy przez 5 minut przy dyn / cm2
[podobne: gaz rozweselający allegro, cystis epidermalis, zespół tietza ]