kamienie żółciowe przyczyna

Liczbę ruchomych komórek obliczano jako średnią z 4 różnych pól w każdym punkcie czasowym każdego niezależnego eksperymentu. Wartości reprezentują średnią arytmetyczną. SEM liczba toczących się komórek obliczona z 3 niezależnych eksperymentów. Podzbiór limfocytów migdałków B oddziałujących z E-selektyną ma fenotyp pamięci. Aby scharakteryzować fenotypowo podzbiór komórek B, które toczą się na selektynie E, przeprowadziliśmy testy adhezji do monowarstwy CHO-E w warunkach rotacji, która przypomina ścinanie przepływu, umożliwiając nam odzyskanie i badanie komórek adherentnych wobec selektyny. Analizowano ekspresję różnych markerów komórek B na komórkach adherentnych, jak również w niefrakcjonowanej populacji komórek B. Barwienie znacznikiem komórek B CD19 wykazało, że zarówno całkowita, jak i przylegająca populacja zawierała tylko limfocyty B bez zanieczyszczenia komórek CHO. Analiza ekspresji CD38, CD44 i CD10 wykazuje, że niefrakcjonowane komórki składają się z niejednorodnej populacji, która wyraża różne poziomy tych markerów powierzchniowych (Figura 4a). Przeciwnie, większość komórek w przylegającej populacji była ujemna dla markerów GC CD38 i CD10, ma niskie poziomy markerów aktywacji CD5 i CD23 i ma wysoki poziom CD44 (Figura 4a). Zatem komórki B adherentne wobec E-selektyny mają CD38a, CD44 ++, CD10. fenotyp, opisany dla komórek B wypełniających przedziały inne niż GC. Figura 4 Subpopulacja wiążąca E-selektynę . składa się z CD19 +, CD5a, CD44 ++, CD23a, CD38a, CD10a i IgDa. limfocyty B pamięci. Limfocyty B oczyszczone z ludzkich migdałków pozwolono przyłączyć do monowarstwy CHO-E w studzienkach C6 w warunkach rotacji (72 rpm) w 37 ° C; następnie studzienki przepłukano, a komórki adherentne zebrano i analizowano za pomocą FACS, jak opisano w Methods. (a) Histogramy pokazujące ekspresję CD19, CD5, CD44, CD23, CD38 i CD10 na całkowitą i przylegającą populację komórek B. Procent komórek dodatnich (wysoce pozytywny pod względem CD44, ++) jest pokazany w prawym górnym rogu każdego pola histogramu. (b) Przeprowadzono podwójne barwienie całkowitych i przylegających subpopulacji. Przedstawiono wybarwianie mAb skierowanym na CD38, CD44 w FL-2 i IgD w FL-1. Residual B komórki poza GC wtórnych narządów limfoidalnych obejmują limfocyty naiwne i pamięci, które można odróżnić poprzez ekspresję powierzchniowej IgD komórki (1). Postanowiliśmy zatem zbadać ekspresję IgD w subpopulacji całkowitej i selektynie .-selektynowej. Analiza podwójnego zabarwienia wykazała, że przylegająca CD38. komórki były głównie IgD. (Figura 4b), w ten sposób wykazując fenotyp zgodny z obserwowanym dla limfocytów B wtórnej pamięci węzłów chłonnych. Jak już opisano tutaj, podzbiór CD38 + IgD. który odpowiadał komórkom GC był nieobecny w przylegającej populacji (Figura 4b). Ponadto komórki CD44 ++ nie zawierające GC w niefrakcjonowanej populacji składały się z 2 odrębnych populacji komórek, IgD + i IgDa, podczas gdy komórki CD44 ++ w adherentnej populacji były jednolicie IgDy. komórki B pamięci (rysunek 4b). Stąd komórki zdolne do interakcji z E-selektyną były głównie pamięcią CD38-, CD44 ++, IgD. Limfocyty B. Przeprowadzono dalsze analizy ekspresji różnych cząsteczek adhezyjnych na komórkach adherentnych z selektyną. Poziom integryny LFA-1 był podobny zarówno w całkowitej, jak i przylegającej subpopulacji. Przeciwnie, komórki adherentne wyrażały wyższe poziomy podjednostek integryny a4, A5, A, P x, jak również inne cząsteczki adhezyjne, takie jak L-selektyna (Tabela 1). Tabela Ekspresja cząsteczek adhezyjnych w całkowitej subpopulacji limfocytów B i E-selektynowej limfocytów B Walka komórek B na E-selektynie jest niezależna od wcześniej opisanych ligandów selektyny, ale wymaga kwasu sialowego na powierzchni limfocytów. Wykazano, że różne determinanty węglowodanowe dekorują ligandy selektynowe; w ten sposób ekspresja funkcjonalnych ligandów selektynowych wymaga glikozylacji, która jest przeprowadzana przez różne (3 (1-3)-fukozylotransferazy (FucTs) (4)
[podobne: rozpoznanie wg icd 10, serwatka z mleka owczego, złoto koloidalne ]