Plazmid pBTM116 / CDK4 wprowadzono do L40 Saccharomyces cerevisiae przez transformację octanem litu. Kolonie selekcjonowano na pożywce Trp (-), transformowano plazmidami pVP16 / p16 zawierającymi allele typu dzikiego lub wariantowe CDKN2A i selekcjonowano na pożywce Trp (-) / Leu (-). Pozostałe kolonie hodowano następnie w pożywce Trp (-) / Leu (-) przez noc w 37 ° C, a do oznaczenia ilościowego wiązania CDKN2A z CDK4 użyto kolorymetrycznego t...
Podobne poziomy hamowania obserwowano dla wytrącania ESL-1 z komórek 32Dcl3, przy użyciu tego samego białka fuzyjnego selektyny E (34). Figura 9 Izolacja z udziałem powinowactwa ligandów E-selektyny z ludzkich migdałkowych komórek B. Limfocyty B wyizolowano z ludzkich migdałków i powierzchni biotynylowanej, jak opisano w Metodach (a). Komórki 32Dcl3 znakowano metabolicznie [35S] metioniną / [35S] cysteiną, jak opisano w Metodach (b). Deterge...
Tkanki maziowe uzyskano od 12 chorych na RA i 3 pacjentów OA (b). Część tkanki wycięto na małe kawałki (1 g), dobrze spłukano PBS (pH 7,4) i hodowano w ml RPMI-1640 zawierającym 100 U / ml penicyliny, 10 ug / ml streptomycyny, i 2 mM L-glutaminy przez 3 dni w 5% CO2 w powietrzu w 37 ° C. Pożywki hodowlane zebrano i zmierzono ich stężenia IL-17 przy użyciu zestawu ELISA dla ludzkiej IL-17. Obliczono średnią wartość stężenia IL-17 3 maz...
