okulista jaroszewicz siedlce starowiejska

Ogółem jednojądrzaste komórki płuc wyizolowano z dwóch C57BL / 6 i czterech IL-12 p / P myszy 27 dni po zakażeniu, barwiono immunologicznie i analizowano pod kątem ekspresji Mac i MHC klasy II metodą FACS. Bramkowanie przeprowadzono na populacjach komórek bogatych w makrofagi (aib) i przeprowadzono analizę w celu zidentyfikowania komórek pozytywnych dla Mac (c i d), MHC klasy II (e i f) lub obu (g i h). . Znaczone uwalnianie IFN-y, ale nie TNF-a, przez makrofagi płuc wymaga zarówno IL-12, jak i prątków. Do tej pory wykazaliśmy uwalnianie cytokin typu 1, IL-12, IFN-a i TNF-a. z makrofagów podczas zakażenia prątkami płuc i zapotrzebowania na IL-12 na IFN-y, ale nie na uwalnianie TNF-a. Ponieważ makrofagi wyizolowane od zainfekowanych myszy typu dzikiego były wstępnie aktywowane w wyniku równoczesnej ekspozycji na wysokie stężenia nie tylko IL-12, ale innych cytokin typu 1, jak również prątków w płucach, wciąż pozostaje do ustalenia, czy IL -12 miał bezpośredni wpływ stymulujący na IFN-y makrofagów zwolnij i czy ten IFN-. reakcja wymagała zarówno IL-12, jak i prątków. W tym celu wyizolowaliśmy makrofagi płucne z naiwnej, nieinfekowanej IL-12 A /. myszy i badano IFN-y i TNF-a odpowiedzi tych komórek stymulowane albo prątkami albo samą IL-12, albo obydwoma. Jak pokazano na Figurze 4a, nie było IFN-y uwalnianie z lub bez prątków lub samych LPS. Niski poziom IFN-y uwalnianie, w zakresie od około 18 do 35 pg / ml, obserwowano, gdy komórki te hodowano z różnymi dawkami samej IL-12 (Figura 4b). Jednak efekt synergiczny zaobserwowano, gdy makrofagi były stymulowane zarówno IL-12 jak i LPS. Najbardziej uderzający efekt synergiczny zaobserwowano, gdy komórki stymulowano zarówno IL-12, jak i prątkami (Figura 4b). W takich warunkach IFN-y uwalnianie wydawało się zależne od IL-12, a najwyższy poziom wynosił 1200 pg / ml (Figura 4b). Ponieważ populacja makrofagów użyta w tych doświadczeniach była czysta w ponad 98%, jest mało prawdopodobne, aby niewielka liczba komórek innych niż makrofagi mogła znacząco przyczynić się do wysokiego poziomu IFN-y. produkcja w tych warunkach. Aby zbadać, czy oprócz żywych prątków lub LPS, drugi sygnał wymagany do IFN-y makrofagów uwalnianie może być martwymi prątkami, antygenami prątkowymi lub niemikrobiologicznym bodźcem, hodowaliśmy makrofagi płucne od naiwnego IL-12 (3). myszy w obecności IL-12 i zabitych ciepłem prątków (DBCG), antygenu mykobakterii (PPD) lub antygenu drobnoustrojowego (OVA) i badano IFN-y odpowiedź. Warto zauważyć, że podczas DBCG lub PPD w obecności IL-12 stymulowane znakowane IFN-y uwalnianie (chociaż na niższych poziomach w porównaniu z żywą stymulacją mykobakteryjną), OVA z IL-12 lub bez IL-12 nie indukowało IFN-y uwalnianie z makrofagów płucnych (Figura 4c), w przeciwieństwie do prątków, PPD lub LPS (Figura 4b). W tych samych warunkach hodowli OVA w obecności IL-12 uwalnia około 150 pg / ml TNF-a. Wyniki te jasno demonstrują krytyczne zapotrzebowanie zarówno na IL-12, jak i czynniki drobnoustrojowe, szczególnie wewnątrzkomórkowe patogeny, dla optymalnego IFN-a. odpowiedź w makrofagach. Aby sprawdzić, czy TNF-a uwalnianie było niezależne od IL-12P, mierzono również TNF-a poziomy w supernatantach z IL-12a /. makrofagi stymulowane prątkami lub samym LPS. W ostrym kontraście z brakiem IFN-y uwalnianie w tych warunkach (Figura 4a), TNF-a był znacząco indukowany przez stymulację prątkami lub samym LPS (Figura 5). Pod tym względem sam IL-12 miał niewielki wpływ na TNF-a. wydanie (dane nie pokazane). Wyniki te potwierdziły wyniki uzyskane przy użyciu makrofagów z zainfekowanej IL-12 (3 (3). płuca, które TNF-a odpowiedź w makrofagach podczas infekcji mykobakteryjnej była niezależna od IL-12B. Rysunek 4IFN-. produkcja świeżo izolowanych makrofagów płucnych z naiwnego IL-12. /. myszy
[hasła pokrewne: euromedic olsztyn, cystis epidermalis, mielopatia szyjna objawy ]