opal kamień właściwości

Zmiany skórne wykazują znaczne zgrubienie skóry i naskórka, naciek komórkowy składający się z limfocytów T i eozynofili oraz podwyższony poziom IL-4, IL-5 i IFN-y. mRNA. Wykorzystaliśmy nasz model i dostępność myszy z ukierunkowaną delecją genów cytokin, aby zbadać rolę IL-4, IL-5 i IFN-y w patogenezie AD. Otrzymane wyniki sugerują, że wszystkie trzy cytokiny przyczyniają się do zmian w AD. IL-4 i IL-5 są ważne dla infiltracji eozynofilów, a IL-5 i IFN-a. są ważne dla hipertrofii skóry. Ponadto, IL-4 może odgrywać rolę przeciwzapalną w AD dzięki jej zdolności do modulowania ekspresji chemokin T-komórek i późniejszej rekrutacji komórek T w uszkodzeniu skóry. Metody Uczulanie myszy. IL-4. /. i IFN – /. myszy na podłożu BALB / c uzyskano z The Jackson Laboratory (Bar Harbor, Maine, USA) i IL-5. /. myszy na podłożu C57BL / 6 zostały podarowane przez M. Kopfa (Freiburg, Niemcy). IgE. /. myszy wytworzono zgodnie z wcześniejszym opisem (22). Myszy BALB / c, C57BL / 6 i 129Sv typu dzikiego (WT) zakupiono z Taconic Farms (Germantown, New York, USA). Wszystkie myszy trzymano w środowisku wolnym od patogenów. Wszystkie procedury wykonywane na myszach były zgodne z Komisją ds. Opieki nad zwierzętami i wykorzystywaniem dzieci w szpitalu. Uczulanie skórne cztero- do sześciotygodniowych samic myszy przeprowadzono jak opisano wcześniej (21). Pokrótce, myszy znieczulono metoksyfluranem (Metofane, Schering-Plough Animal Health Corp., Union, New Jersey, USA), a następnie ogolono golarką elektryczną. Sto mikrogramów OVA (klasa V, Sigma Chemical Co., St. Louis, Missouri, USA) w 100 ul soli fizjologicznej lub placebo (100 ul soli fizjologicznej) umieszczono na łatce sterylnej gazy (1 x cm), który został przymocowany do skóry przezroczystym opatrunkiem bioocclusive (Johnson & Johnson Medical Inc., Arlington, Texas, USA). Plastry umieszczano na okres jednego tygodnia, a następnie usuwano. Dwa tygodnie później identyczną łatkę ponownie nałożono na to samo miejsce na skórze. Każda mysz miała w sumie trzy jednotygodniowe ekspozycje na plaster oddzielone od siebie co dwa tygodnie. Przeciwciała. MAb szczurzą i chomika zastosowano do analizy immunohistochemicznej i skierowano przeciw mysiemu CD3. (145-2C11), CD4 (H129,19), CD8. (53-6.7), CD45 (30F11.1) i CD106-VCAM (429 / MVCAM.A). MAb stosowane w ELISA specyficznym wobec OVA były skoniugowanym z biotyną szczurzym klonem przeciw mysiej IgG2a R19-15 i klonem IgE R35-92, szczurzym klonem przeciw mysim IgE mAb klonem R35-72, szczurzym anty-mysim klonem IgG2a klonu R11- 89 i mysie mAb IgG2a 5.7. Wszystkie przeciwciała zakupiono od PharMingen (San Diego, Kalifornia, USA). ELISA. Myszy pobrano krew i surowice zebrano jeden dzień po zakończeniu serii trzech epizootycznych uczuleń. Do ilościowego określenia całkowitej ilości IgE i IgG2a w surowicy zastosowano standardowy protokół PharMingen do testu kanapkowego ELISA. Do pomiarów IgE zastosowano szczurzy anty-mysie klony IgE mAb R35-72 do pokrycia płytek, a do wykrywania zastosowano szczurzy anty-mysie klony IgE mAb R35-92. W przypadku pomiarów IgG2a w surowicy myszy BALB / c i C57BL6, przeciwciała powlekające były odpowiednio szczurzym R12-14 mAb i mysie 5,7 mAb, a przeciwciała do wykrywania były odpowiednio szczurzymi mAb R19-15 i mysimi 5,7 mAb. Przeciwciała swoiste dla IgG2a i IgE OVA mierzono jak opisano poprzednio przy użyciu mAb s wymienionych powyżej (21). Analiza histologiczna. W badaniu histopatologicznym pobierano próbki z załatanych miejsc na skórze 24 godziny po usunięciu łaty z trzeciego uczulenia. Próbki utrwalono w 10% zbuforowanej formalinie i zatopiono w parafinie. Wiele skrawków o długości 4 um zabarwiono hematoksyliną i eozyną (H & E) lub Giemsa
[przypisy: ciemnozielony stolec, ziemia okrzemkowa allegro, rozpoznanie wg icd 10 ]