szpital w głogowie opinie

W tym celu podjęliśmy próbę porównania zdolności makrofagów do uwalniania cytokin typu w dzikim typie i IL-12 p / I. myszy po dooponowej inokulacji żywego M. bovis BCG. Makrofagi płucne wyizolowane w dniach 27 i 43 po zakażeniu hodowano z lub bez stymulacji PPD lub LPS. Warto zauważyć, że makrofagi uzyskane w dniu 27 od myszy typu dzikiego spontanicznie uwolniły znaczące ilości IL-12, IFN-a i TNF-a. (Figura 1, a c), sugerując aktywację tych makrofagów i ich udział w wytwarzaniu cytokiny typu w płucu. Poziom tych cytokin zwiększył się dalej po stymulacji PPD lub LPS (Figura 1). W ostrym kontraście, nie było spontanicznego uwalniania IFN-y przez makrofagi płucne wyizolowane z płuc IL-12 P /. myszy w 27 dniu po zakażeniu, a komórki te również nie uwolniły żadnego IFN-y po stymulacji (rysunek 1b). Te wyniki sugerują zaangażowanie IL-12, bezpośrednio lub pośrednio, w IFN-y. odpowiedzi makrofagów w płucach. W przeciwieństwie do IFN-y, podobne ilości TNF-a były spontanicznie uwalniane z makrofagów z IL-12a /. myszy typu dzikiego i oba reagowały podobnie do stymulacji PPD lub LPS przy uwalnianiu TNF-a. (Figura 1c). Sugeruje to, że TNF-a odpowiedź makrofagów podczas infekcji płucnych mykobakterii nie zależy od IL-12. Podobnie, w 43 dniu po zakażeniu, podczas gdy poziom spontanicznego uwalniania IL-12, IFN-a i TNF-a przez makrofagi z myszy typu dzikiego zmniejszono, te makrofagi były nadal zdolne do uwalniania wszystkich tych cytokin po stymulacji PPD lub LPS (Figura 2, a (cc). Zgodnie z obserwacjami w dniu 27, podczas stymulacji makrofagów z IL-12 p / l. myszy wciąż nie uwolniły IFN-y, uwolniły TNF-a na poziomie porównywalnym z komórkami z myszy typu dzikiego (figura 2, a (c). Figura Wytwarzanie cytokiny typu z płucnych makrofagów podczas infekcji mykobakteryjnej. Makrofagi izolowano z płuc C57BL / 6 i IL-12 p / P myszy 27 dni po zakażeniu i hodowano z lub bez stymulacji PPD lub LPS w 37 ° C przez 72 godziny. Supernatanty zmierzono dla (a) IL-12, (b) IFN-a i (c) TNF-a. przez specyficzne zestawy ELISA. Wyniki są wyrażone jako średnie. SEM z potrójnych próbek dla każdego warunku i są reprezentatywne dla trzech niezależnych doświadczeń. IL-12, interleukina-12; IFN-y, interferon-a; TNF-a, czynnik martwicy nowotworów-; PPD, oczyszczona pochodna białka pochodząca z M. tuberculosis; LPS, lipopolisacharyd. Figura 2 Wytwarzanie cytokiny typu z makrofagów płucnych izolowanych 43 dni po zakażeniu prątkami. Warunki hodowli były identyczne z tymi na Fig. 1. Wymaganie IL-12 do fenotypowej aktywacji makrofagów podczas infekcji mykobakteriami płucnymi. Wykazując brak IFN-y odpowiedzi makrofagów z zainfekowanej IL-12a /. płuca myszy, sprawdziliśmy, czy nie było fenotypowej aktywacji tych komórek. W tym celu wyizolowano wszystkie jednojądrzaste komórki płuc z typu dzikiego i IL-12 p / l. myszy 27 dni po zakażeniu, znakowane monoklonalnymi przeciwciałami przeciwko MHC klasy II (marker aktywacji makrofagów) lub Mac (fenotyp makrofagów / marker aktywacji) i analizowane za pomocą analizy FACS przez bramkowanie na populację bogatą w makrofagi (Figura 3, aib) . Stwierdziliśmy, że istnieje znacznie większy procent makrofagów z myszy typu dzikiego niż z IL-12 (3 /. myszy, które wyrażały jasną MHC klasy II (46% w stosunku do 20%) lub Mac (73% w porównaniu z 20%) lub w obu (42% w porównaniu z 7%) (Figura 3, c. h). Intensywność immunobarwienia tych markerów była również znacznie większa w komórkach od myszy typu dzikiego. Te odkrycia sugerują, że brak IL-12 powoduje zmniejszenie liczby i jakości makrofagów w płucach, i możliwe jest, że można to częściowo przypisać brakowi IFN-y. zwolnienie z tych komórek. Figura 3 Analiza fenotypów aktywacji makrofagów w C57BL / 6 (a, c, e i g) vs
[podobne: zielony jęczmień działanie, barszcz zwyczajny a sosnowskiego różnice, złoto koloidalne ]